紫外分光光度計標準操作及維修保養規程

依據：《GMP》與藥品生產質量檢驗的要求

目的：建立紫外分光光度計標準操作及維修保養規程，用以保證實驗儀器操作的一致性。

范圍：紫外分光光度計

1、技術參數

1.1工作波段：200—800nm

1.2波長精度：±0.5nm

1.3雜散光：在于220nm處低于1%

1.4分辨率：儀器能分開貢365.02，365.48，366.29 nm三條譜線。

1.5偷光率測量范圍：0—200%T（數顯100.0相當即于100%T）

1.6吸光度測量范圍：—0.301—3A（數顯1.000相當于1A）

1.7透光率精度：±0.5%

1.8透光率重現性：0.5%

1.9T—A轉換精度：±0.001A

1.10比色皿誤差自動校正精度：±0.1%T

1.11環境條件：溫度5—35℃濕度≤85%

1.12電壓：220V

2、操作前準備

2.1插上電源插頭，閉合光源電器箱開關，“電源”指示燈亮。

2.2選擇燈源：

a.閉合“鎢燈”開關，“鎢燈”指示燈亮，鎢燈被點燃。

b.閉合“氘燈”開關，扳鈕向嚇—3秒，燈絲被加熱后，立即將開關向上打，“氘燈”指示燈亮，氘燈被引燃后，扳鈕自動恢復到中間位置。

2.3光源選擇，根據測量的波段范圍選擇好光源，利用撥桿進行。

2.4將波長指示器置于所需要測的波長。

2.5根據波長選擇比色皿，對于350 nm以上的波長，可以用玻璃比色皿；對于350 nm溶液以下的波長一定要用石英，將比色皿放入托架內（其中一個比色皿放標準溶液，其他比色皿放被測溶液），然后蓋好。

2.6打開“電源”開關，儀器預熱20分鐘。

2.7操作過程中出現199.9數字閃爍，表示光能量大強，應首先打開試樣室蓋（隔斷光路），然后減小狹縫或調整光楔（100%T旋鈕）。

2.8如果波長讀數“零位”走失時，所需波長與計數器顯示值位置不對，可用數量零級光譜來校正，方法如下：松開#15（2只）鎖緊螺釘，轉動#撥桿，使計數

器讀數為000，再轉動#1波長手輪，使輸出光強數碼顯示T值為最大。反復幾次使零級光譜與計數器“零位”相一致后，重新鎖緊#（2只）螺釘。

3、操作過程

3.1透過率、吸收度測量

a.暗電流調零：開啟電源后，若試樣室蓋未打開，將顯示提示符P.1（請做第一步驟操作），打開試樣室蓋直到接觸檢測開關，提示符P.1消失，顯示暗電流值。如果它的絕對值小于5.0，則兩秒內自動歸零，否則可調節面板上之0%T旋鈕。

b.調整參比訊號（100T/OA）：微機所顯示的提示符為P.2（請做第二步操作）。將T—A—C旋鈕開關置T/A，參比溶液放進1號試樣槽并移入光路，關閉試樣室蓋，顯示參比訊號強度，調整狹縫和光楔（試樣槽拉手左面之100%T旋鈕），使顯示數在90.0—119.9%T或相應A值范圍以內，2秒以內將自動調整為100%T/OA。

c.比色皿誤差校正：為校正比色皿的系統誤差，要求在同一次測量過程中，比色皿與槽位編號一一照應。將使用的比色皿盛參比溶液放進試樣槽，移入光路，所顯示的T（或A值）就反映了該與1號槽中比色皿之間的配對誤差。按一下ADJ（Adjust）校正鍵，則誤差數據存入微機并自動校正為100%T/OA。這項操作在每次開機后只需作一次，若所用的比色皿配對性很好，可免去這一步驟。開機時，校正系數初始值為1，即相當于不校正。

d.用同比色皿盛被測溶液放進同一試樣槽，則顯示校正后的透過率或吸光率。

3.2濃度測量

a.標準對照法

b.按3.1節（1）—（3）操作。

c.將標準濃度的樣品放如光路。

d.旋鈕開關至C，分別按三個濃度置數鍵，使顯示數與已知濃度值一致，濃度值僅取其三為有效數字，小數點位置自定義。

e.將被測式樣移入光路，則顯示樣品的濃度（比色皿誤差已校正）。

3.3標準曲線法（標準曲線為直線）

a.按3.1節（1）—（3）操作。

b.旋鈕至A， 調整光楔使A值變化至標準曲線高端某一點的坐標A0。

c.旋鈕至C，按濃度置數鍵顯示數與對應于A0的濃度值C0一致。

d.重新調整對比訊號后按（1）之（4）操作。

3.4測試完畢，依次關閉主機電源開關，電氣箱開關，拔下電源插頭，蓋上護罩。

3.5認真填寫使用操作記錄。

4、保養及注意事項

4.1為了確保儀器能夠穩定工作，電壓變動較大的地方，自備220V穩壓器一只。

4.2當儀器工作時如無輸出、光源不亮，應首先檢查保險絲是否有損壞，然后檢查電路。

4.3儀器外殼要良好接地，其余裸露零件其對地電壓不得超過24V

4.4式樣室應加干燥劑變色硅膠，并經常檢查與更換，保證干燥。

4.5當儀器停止工作時應切斷電源。

4.6比色皿用畢，應立即用蒸餾水沖洗清潔，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦干，

以防止表面光潔度變壞而影響透過率。

4.7為了避免儀器積塵和沾污，在停止工作時間內用塑料套子罩住整個儀器，在套子內放數袋硅膠。

4.8儀器使用半年左右或搬動要檢查波長精度等，以確保儀器使用。易耗元件、光電管和光源，通常使用一定時間后要衰老和損壞，必須調換新的。

4.9燈電亮一段時間后不能用手碰燈，不能留有指紋。

4.10長時間的紫外線照射對眼睛有害，戴上太陽鏡可以保護眼睛。