氣相色譜儀內標法定量分析內標物如何選擇？

一、概述

內標法在氣相色譜?定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被色譜柱所分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾。

二、內標法的概念和內標物的選擇

什么叫內標法?如何選擇內標物?

內標法就是選擇適當的物質作為內標物質，定量加入被測樣品中，根據被測組分和內標物質的峰面積之比，乘以校正因子，對應內標物質加入量所進行的含量測定方法。

※優點：色譜條件對結果影響不大，準確度、精度較高；

※缺點：選擇合適的內標物質比較困難；

內標法是一種間接或相對準確的校準方法；在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校準和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。

使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被色譜拄分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾，只要測定內標物和待測組分的峰面積與相對響應值，即可求出待測組分在樣品中的百分含量。

采用內標法定量時，內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說，內標物應當是一種能得到純樣的己知化合物，這樣它能以準確、已知的量加到樣品中去，它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(如，化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征，最好是被分析物質的同系物。

當然，在色譜分析條件下，內標物必須能與樣品各組分充分分離。需要指出的是，在少數情況下，分析人員可能比較關心化合物在一個復雜過程中所得到的回收率，此時，他可以使用一種在這種過程中很容易被完全回收的化臺物作內標，來測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則。

三、影響內標法定量分析的因素

在使用內標法進行定量時，有哪些因素會影響內標和被測組分的峰高或峰面積比值?

影響內標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面、色譜方面和儀器方面三類；

由化學方面的原因產生的面積比的變化常常在分析重復樣品時出現，化學方面的因素包括：

1、內標物在樣品里混合不好；

2、內標物和樣品組分之間發生反應；

3、內標物純度可變等；

對于較成熟方法來說，色譜方面問題發生的可能性更大，色譜上常見的問題（如：滲漏）對絕對面積的影響較大，對面積比的影響小一些，但如果絕對面積的變化已大到足以使面積比發生顯著變化的程度，那么一定有某個重要的色譜問題存在，如，進樣量改變太大，樣品組分濃度和內標濃度之間有很大差別，檢測器非線性等。進樣量應足夠小并保持不變，這樣才不致于造成檢測器和積分裝置飽和。如果認為方法較可靠，而色譜圖看起來也是正常的話，應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發生懷疑的最有力的證據是：面積比可變，而峰高比保持相對恒定，

四、制作內標標準曲線注意事項

   在制作內標標準曲線時應注意什么?  

   在用內標法做色譜定量分析時，先配制一定重量比的被測組分和內標樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關系曲線，此曲線即為標準曲線。在實際樣品分析時所采用的色譜條件應盡可能與制作標準曲線時所用的條件一致，因此，在制作標準曲線時，不僅要注明色譜條件（如，固定相、柱溫、載氣流速等），還應注明進樣體積和內標物濃度。

在制作內標標準曲線時，各點并不完全落在直線上，此時應求出面積比和重量比的比值與其平均位的標準偏差，在使用過程中應定期進行單點校正，若所得值與平均值的偏差小于2，曲線仍可使用，若大于2，則應重作曲線，如果曲線在較短時期內即產生變動，則不宜使用內標法定量。

（內容參考實驗與分析網）