環(huán)境激素檢測方法有哪些

概述

近年來，一些洗浴劑、洗潔劑深陷“環(huán)境激素”問題，當(dāng)其進(jìn)入人體，內(nèi)分泌系統(tǒng)將其誤認(rèn)為是天然激素，加以吸收利用，占據(jù)了人體細(xì)胞中正常激素的位置，從而引發(fā)內(nèi)分泌紊亂，造成人體正常激素代謝失常，給人體健康帶來潛在的威脅。

那么，究竟什么是“環(huán)境激素”？環(huán)境激素的檢測手段和方法有哪些呢?

一、環(huán)境激素

1、定義

環(huán)境激素又名環(huán)境荷爾蒙，是指干擾動物與人體正常內(nèi)分泌機(jī)能的外源性化學(xué)物質(zhì)。環(huán)境激素廣泛存在于大氣、水和土壤等環(huán)境介質(zhì)中，可以通過大氣沉降、地表徑流、石油泄漏和污染排放等被大量釋放到海洋環(huán)境中。環(huán)境激素很難降解，進(jìn)入海洋后會和水、懸浮顆粒物、水生生物和沉積物相互作用并分配。

2、種類

環(huán)境激素的種類：環(huán)境激素通常可按用途分為13大類，如表1所示。

除此之外，目前還有許多需要進(jìn)一步證實是否具有激素作用的化學(xué)物質(zhì)，隨著研究的不斷深入，一些新的環(huán)境激素類物質(zhì)將被確認(rèn)。

3、特點

環(huán)境激素類物質(zhì)大多屬脂溶性化合物，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，其代謝半衰期長，毒性重點危害表征屬性屬于慢性，且有很強(qiáng)的生物富集性。即使環(huán)境中濃度很低，其也可在生物細(xì)胞中積累，并沿食物鏈逐級傳遞進(jìn)行富集，最后以極高的濃度進(jìn)入人和高等動物體內(nèi)，積蓄在腦和性腺等組織中。

二、環(huán)境激素的檢測方法

鑒于環(huán)境激素的危害有很多，如我們熟知的生殖異常、動物雌性化、致癌致畸。那么該如何對這類物質(zhì)進(jìn)行監(jiān)測、進(jìn)而監(jiān)管成為擺在我們面前的一個難題。下面將結(jié)合實驗室的分析手段對環(huán)境激素的檢測進(jìn)行具體闡述。

1、預(yù)濃縮手段

目前的預(yù)濃縮手段以索氏抽提和液液萃取為主，當(dāng)然也有使用固相萃取的，但這些一般用在儀器分析上比較多。當(dāng)用到生物分析時，由于萃取劑對受試生物的毒性作用，會使結(jié)果出現(xiàn)較大偏差。

2、檢測手段

   從大類上分，目前環(huán)境激素的檢測手段可以分為儀器法和生物法兩大類，兩者相輔相成，各有千秋。

2.1 儀器法

儀器法是環(huán)境激素測試的傳統(tǒng)方法，根據(jù)其分子大小、質(zhì)量、電荷等理化特性來進(jìn)行檢測。隨著儀器檢測技術(shù)的不斷提升，環(huán)境激素的檢測方法也越來越多，包括ICP等離子體發(fā)射光譜儀、HPLC-FL高效液相色譜儀、LC-MS液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、GC-MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、GC-ECD-MS氣相色譜（電導(dǎo)檢測器）-質(zhì)譜聯(lián)用儀等。

從總體上來說，這些儀器幾乎可以測試表中所有的70的物質(zhì)。除了已知的三種有環(huán)境激素效應(yīng)的重金屬是使用ICP分析外，其余的物質(zhì)基本都是采用氣相色譜儀或者高效液相儀以進(jìn)行分離，然后根據(jù)物質(zhì)特性，采用ECD、MS、FL等檢測器進(jìn)行精確定量。

相對專一性精確分析是儀器法的優(yōu)點，同時也是該方法的缺點。特別是對于較大分子的物質(zhì)，由于LC無法做出譜庫，若沒有標(biāo)準(zhǔn)物對照，很難定性定量，所以對未知的物質(zhì)很難做出分析。

同時儀器法的精確指的是對物質(zhì)分類定量的精確性，但是其測試結(jié)果中得不到關(guān)于環(huán)境激素類物質(zhì)對生物體綜合影響（或者說是毒性）信息。

2.2 生物法

鑒于儀器法存在的各種缺陷，于是生物法就有了其存在著的意義。雖說其在定量上的精度比不上儀器法的準(zhǔn)確，測試結(jié)果的精密度相對也較低（可能是由于受試材料的差異性），但很多生物法卻能很好地給出環(huán)境激素對生物體影響效應(yīng)的指導(dǎo)信息，這對于評估化合物或者受試樣品的危害性有著十分重要的意義（我們最關(guān)心的不應(yīng)該是某個物質(zhì)多少濃度，而是對我們是不是有影響。如果沒啥影響，高了低了也可以放任不管）。

目前常用的測試環(huán)境激素的生物方法有形態(tài)學(xué)檢測法、卵黃蛋白原(VTG)檢測法、酶聯(lián)免疫法、重組基因酵母法、子宮增重試驗、受體競爭試驗、內(nèi)源基因表達(dá)法等。下面介紹幾種較為常用、也相對簡單的方法，以及使用生物法測試環(huán)境激素的常用設(shè)備。

2.2.1 形態(tài)學(xué)檢測法

形態(tài)學(xué)檢測法中最常用的是日本青鳉。青鳉有伴性的體色基因r，利用其等位基因可制出通過體色差異區(qū)別雌雄的系統(tǒng)，能靠體色分清遺傳的雌雄。故而可以通過低劑量胚胎染毒試驗，方便地分析雌雄比，可以確定受試樣品是否具有雌激素效應(yīng)。這個方法是最經(jīng)濟(jì)的，如果自己培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)魚種的話，這個實驗基本不花什么錢。

2.2.2 卵黃蛋白原(VTG)檢測法

卵黃蛋白原(VTG)檢測法是目前使用較多的一種方法，目前有鯽魚、鯉魚、蝶蛹金小蜂、小龍蝦卵黃蛋白原等多個種類的試劑盒可供選擇。由于ELISA只能檢測到有免疫反應(yīng)性的細(xì)胞因子蛋白的含量，而這并不能完全代表細(xì)胞因子的生物活性的水平，所以也有一定缺陷。此外這些試劑盒目前的價格還較高，如果買成品的話批量試驗費用較高。

2.2.3 EROD酶聯(lián)免疫法

測二噁英的，而用的材料是鼠肝癌細(xì)胞。不過這個細(xì)胞不是很好培養(yǎng)。總體評價下，實驗材料不貴，但這實驗不好做；而且測試的是二噁英——環(huán)境激素中最毒的一個，不是環(huán)境激素總體效應(yīng)。

2.2.4 重組基因酵母法

費用下來有點貴。

3、小結(jié)

儀器法和生物法對于環(huán)境激素類物質(zhì)的分析測試相輔相成，生物法適合對樣品是否受到環(huán)境激素污染進(jìn)行定性，且能給出樣品對生物影響的信息。而儀器法則適合在生物法給出環(huán)境激素污染的前提下，對環(huán)境激素種類進(jìn)行鑒定，確定主要污染物，進(jìn)而對污染進(jìn)行源解析。

（內(nèi)容來源儀器信息網(wǎng)）