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      環境激素檢測方法有哪些

      點擊: 次 時間:2016-11-03 10:17

      概述

      近年來,一些洗浴劑、洗潔劑深陷“環境激素”問題,當其進入人體,內分泌系統將其誤認為是天然激素,加以吸收利用,占據了人體細胞中正常激素的位置,從而引發內分泌紊亂,造成人體正常激素代謝失常,給人體健康帶來潛在的威脅。

      那么,究竟什么是“環境激素”?環境激素的檢測手段和方法有哪些呢?

      一、環境激素

      1、定義

      環境激素又名環境荷爾蒙,是指干擾動物與人體正常內分泌機能的外源性化學物質。環境激素廣泛存在于大氣、水和土壤等環境介質中,可以通過大氣沉降、地表徑流、石油泄漏和污染排放等被大量釋放到海洋環境中。環境激素很難降解,進入海洋后會和水、懸浮顆粒物、水生生物和沉積物相互作用并分配。

      2、種類

      環境激素的種類:環境激素通常可按用途分為13大類,如表1所示。

      除此之外,目前還有許多需要進一步證實是否具有激素作用的化學物質,隨著研究的不斷深入,一些新的環境激素類物質將被確認。

      3、特點

      環境激素類物質大多屬脂溶性化合物,化學性質穩定,其代謝半衰期長,毒性重點危害表征屬性屬于慢性,且有很強的生物富集性。即使環境中濃度很低,其也可在生物細胞中積累,并沿食物鏈逐級傳遞進行富集,最后以極高的濃度進入人和高等動物體內,積蓄在腦和性腺等組織中。

      二、環境激素的檢測方法

      鑒于環境激素的危害有很多,如我們熟知的生殖異常、動物雌性化、致癌致畸。那么該如何對這類物質進行監測、進而監管成為擺在我們面前的一個難題。下面將結合實驗室的分析手段對環境激素的檢測進行具體闡述。

      1預濃縮手段

      目前的預濃縮手段以索氏抽提和液液萃取為主,當然也有使用固相萃取的,但這些一般用在儀器分析上比較多。當用到生物分析時,由于萃取劑對受試生物的毒性作用,會使結果出現較大偏差。

      2、檢測手段

         從大類上分,目前環境激素的檢測手段可以分為儀器法和生物法兩大類,兩者相輔相成,各有千秋。

      2.1 儀器法

      儀器法是環境激素測試的傳統方法,根據其分子大小、質量、電荷等理化特性來進行檢測。隨著儀器檢測技術的不斷提升,環境激素的檢測方法也越來越多,包括ICP等離子體發射光譜儀、HPLC-FL高效液相色譜儀、LC-MS液相色譜-質譜聯用儀、GC-MS氣相色譜-質譜聯用儀、GC-ECD-MS氣相色譜(電導檢測器)-質譜聯用儀等。

      從總體上來說,這些儀器幾乎可以測試表中所有的70的物質。除了已知的三種有環境激素效應的重金屬是使用ICP分析外,其余的物質基本都是采用氣相色譜儀或者高效液相儀以進行分離,然后根據物質特性,采用ECD、MS、FL等檢測器進行精確定量。

      相對專一性精確分析是儀器法的優點,同時也是該方法的缺點。特別是對于較大分子的物質,由于LC無法做出譜庫,若沒有標準物對照,很難定性定量,所以對未知的物質很難做出分析。

      同時儀器法的精確指的是對物質分類定量的精確性,但是其測試結果中得不到關于環境激素類物質對生物體綜合影響(或者說是毒性)信息。

      2.2 生物法

      鑒于儀器法存在的各種缺陷,于是生物法就有了其存在著的意義。雖說其在定量上的精度比不上儀器法的準確,測試結果的精密度相對也較低(可能是由于受試材料的差異性),但很多生物法卻能很好地給出環境激素對生物體影響效應的指導信息,這對于評估化合物或者受試樣品的危害性有著十分重要的意義(我們最關心的不應該是某個物質多少濃度,而是對我們是不是有影響。如果沒啥影響,高了低了也可以放任不管)。

      目前常用的測試環境激素的生物方法有形態學檢測法、卵黃蛋白原(VTG)檢測法、酶聯免疫法、重組基因酵母法、子宮增重試驗、受體競爭試驗、內源基因表達法等。下面介紹幾種較為常用、也相對簡單的方法,以及使用生物法測試環境激素的常用設備。

      2.2.1 形態學檢測法

      形態學檢測法中最常用的是日本青鳉。青鳉有伴性的體色基因r,利用其等位基因可制出通過體色差異區別雌雄的系統,能靠體色分清遺傳的雌雄。故而可以通過低劑量胚胎染毒試驗,方便地分析雌雄比,可以確定受試樣品是否具有雌激素效應。這個方法是最經濟的,如果自己培養標準魚種的話,這個實驗基本不花什么錢。

      2.2.2 卵黃蛋白原(VTG)檢測法

      卵黃蛋白原(VTG)檢測法是目前使用較多的一種方法,目前有鯽魚、鯉魚、蝶蛹金小蜂、小龍蝦卵黃蛋白原等多個種類的試劑盒可供選擇。由于ELISA只能檢測到有免疫反應性的細胞因子蛋白的含量,而這并不能完全代表細胞因子的生物活性的水平,所以也有一定缺陷。此外這些試劑盒目前的價格還較高,如果買成品的話批量試驗費用較高。

      2.2.3 EROD酶聯免疫法

      測二噁英的,而用的材料是鼠肝癌細胞。不過這個細胞不是很好培養。總體評價下,實驗材料不貴,但這實驗不好做;而且測試的是二噁英——環境激素中最毒的一個,不是環境激素總體效應。

      2.2.4 重組基因酵母法

      費用下來有點貴。

      3、小結

      儀器法和生物法對于環境激素類物質的分析測試相輔相成,生物法適合對樣品是否受到環境激素污染進行定性,且能給出樣品對生物影響的信息。而儀器法則適合在生物法給出環境激素污染的前提下,對環境激素種類進行鑒定,確定主要污染物,進而對污染進行源解析。

      (內容來源儀器信息網)



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