高效液相色譜儀有哪些操作注意事項
點擊: 次 時間:2017-02-09 10:24
本文主要說明高效液相色譜儀HPLC12小點的使用注意事項。
1.流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。
2.流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應該恢復到室溫后使用。
3.不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
4.使用緩沖溶液時，做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
5.長時間不用儀器，應該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相（如，甲醇等），因為純水易長霉。
6.每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
7.C18柱絕對不能進蛋白樣品，血樣、生物樣品。
8.堵塞導致壓力太大，按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗，清洗方法：
①以異丙醇作溶劑沖洗：
②放在異丙醇中間用超聲波清洗；
③用10%稀硝酸清洗；
9.氣泡會致使壓力不穩，重現性差，所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。
10.如果進液管內不進液體時，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進行流動相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。
12.更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。
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