飼料中喹乙醇的測定方案

概述

據央視315晚會曝光，有的養殖戶和廠家將的黃色粉末狀藥物（喹乙醇）喂食給了動物。喹乙醇長期使用，會蓄積在動物體內，誘變細胞染色體畸形，此外還會造成耐藥性，給人類身體健康帶來潛在危害。

喹乙醇又稱喹酰胺醇，由于喹乙醇有中度至明顯的蓄積毒性，對大多數動物有明顯的致畸作用，對人也有潛在的三致性，即致畸形，致突變，致癌。

因此喹乙醇在美國和歐盟都被禁止用作飼料添加劑。《中國獸藥典》(2005版)也有明確規定，喹乙醇被禁止用于家禽及水產養殖。

本文主要介紹某飼料中喹乙醇的測定。

一、參考標準和實驗原理

1、參考標準：GBT 8381.7-2009 飼料中喹乙醇的測定高效液相色譜儀法

2、原理：飼料試樣中的喹乙醇經過甲醇水溶液提取， PLS固相萃取小柱凈化，液相色譜C18色譜柱分離，紫外檢測器分析。

二、儀器與試劑

全自動高通量柱膜通用固相萃取系統；二元高壓梯度高效液相色譜儀；恒溫振蕩器；高速離心機；

甲醇（色譜純FISHER Chemical）；鹽酸（分析純）；超純水（實驗室制備）。

三、實驗過程

1、標準貯備液配置

用容量瓶準確配置喹乙醇標準貯備液為100ug/mL，選用甲醇定溶。

2、飼料樣品處理

（1）提取

取5g飼料樣品于具塞錐形瓶中，加入50mL5%甲醇水溶液，放入振蕩器，恒溫振蕩45min，將提取液導入離心管，3500r/min離心10min，取上清液過0.45um濾膜過濾，等待全自動固相萃取儀凈化。

（2）凈化

SPE柱活化：臨用前將3mL甲醇和3mL超純水分別以3mL/min過柱，注意不要讓萃取柱填料干涸；

上樣：取5mL提取液上清液液過柱，流速不大于3mL/min；

淋洗：用3mL淋洗液淋洗小柱，3mL/min，氮氣吹干10秒；

洗脫：用2mL40%甲醇水溶液以3mL/min洗脫并收集，氮氣吹干60秒。

（3）樣品加標處理

將提取樣品的上清液，加標后樣品濃度10ug/mL，用來測定全自動固相萃取系統加標回收率。

四、實驗分析

1、液相色譜條件

色譜柱：Labtech C18（250×4.6 mm，5 μm）

流動相：甲醇 : 水=15 : 85

流速：1.0 mL/min

柱溫：30 ℃

檢測器：UV 260 nm

2、定量測定

將10ug/mL喹乙醇標準樣品進液相色譜分析，查看色譜圖，查看飼料樣品提取液空白液相色譜分析圖、飼料樣品提取液加標濃度10ug/mL色譜圖。

3、樣品加標回收率結果

表1樣品加標10ug/mL回收率

五、結論與討論

本方法使用全自動高通量柱膜通用固相萃取系統凈化飼料中喹乙醇回收率在90.9%~96.3%，RSD為2.0%。

結果比較理想，驗證樣品加標濃度在10ug/mL回收率可靠，實驗可行，避免人工操作繁瑣的問題。

注：本文僅代表個例，不具有普適性，僅作為方法探討。

（內容參考儀器信息網）