微生物菌群的分離純化和培養鑒定詳細說明

    隨著人們生活水平的不斷提高，食品、醫藥、飲用品、化妝品等行業均需要微生物檢測。在微生物檢測中，需要了解微生物菌群的分離純化、培養、鑒定及保藏。

一、微生物純培養分離技術

獲得純培養物對微生物學研究至關重要，純培養物是指來源于同一單細胞的細胞群體。

從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中，不僅需要通過分離純化技術從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物，而且還必須隨時注意保持微生物純培養物的純潔，防止其他微生物的混入。

1、平板涂布法

因為將微生物懸液先加到較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，且采用稀釋倒平板法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學研究中常用的純種分離方法是涂布平板法。

用途：一般多用于從菌種的純化；

優點：可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離；

缺點：不能計數。

2、平板劃線法

最簡單的分離微生物的方法是平板劃線法，其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離目的的。劃線的方法很多，常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。

用途：一般多用于篩選菌株。一般用于平板培養基的回收率計數。 

優點：可以計數，可以觀察菌落特征。 

缺點：吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延。如果菌液密度大的話，長不出單菌落。

二、大腸菌種的培養鑒定

大腸菌群能在乳糖膽鹽液體培養液中生長，并且產氣產酸，使培養液變色。還能在伊紅美蘭固體培養上生長，形成黑紫色的菌落，有的還有金屬光澤。其他病原菌的菌落呈粉紅色。再做鏡檢觀察是無芽孢的革蘭氏陰性桿菌（呈紅色）。即可鑒定是有大腸菌群的菌存在。

三、菌種保藏

菌種保藏是將微生物的菌種經長時間的保存，不污染其它雜菌，及可保持其形態特征和生理性狀，減少變異，防止衰老，以便于將來使用。保藏菌種一般是選用它的休眠休，如孢子；芽孢等等，并且要創造一個低溫；干燥；缺氧；避光和缺少營養的環境條件，以利于休眠體能長期地處于休眠狀態。對于不產孢子的微生物，應使其新陳代謝處于最低狀態，又不會死亡，從而達到長期保存的目的。

（內容來源實驗與分析）