液相色譜儀流動相的配制與使用介紹

液相色譜儀是藥物分析工作者最常使用的儀器之一，本文主要說明液相色譜流動相的配制與使用。

1、恒度洗脫

將水相與有機相混合后、使用混合型過濾膜抽濾，用一個管路(如A管)泵入儀器，這是基本原則。若使用兩個管路(一個純水相、一個純有機相)泵入儀器，極易造成水相中鹽和表面活性劑的少量析出。

剩余的流動相可繼續使用，需密封后放置于陰涼處，待下次實驗時與新配制的流動相混合后使用。無需擔心發霉、無機鹽析出、揮發、比例不準等問題。

2、梯度洗脫

流動相最為科學的配制方式如下：

（1）A相為高比例水相-低比例有機相，B相為低比例水相-高比例有機相(英國藥典如此規定)；

（2）A相為高比例水相-低比例有機相，B相為純有機相。

最不科學的為：A相為純水相、B相為純有機相，這會導致基線漂移嚴重，難以進行穩定的雜質檢測。

梯度洗脫結束后，建議經5min后回到初始狀態，再穩定5min后開始下一測定。這10min的穩定極為關鍵，切勿短時間內回到初始狀態，會對儀器和色譜柱造成損害。一周內，對梯度洗脫進行連續試驗，結果是：第一針與最后一針主成分保留時間相差均小于6s。

引申閱讀：水相中溶質的溶解

水相中需溶解的無機鹽和表面活性劑等固體溶質，建議采用加熱法，不建議采用振搖、超聲等方式。因為振搖、超聲有可能使得溶質處于“臨界膠團濃度”，其后一旦遇到某特殊情形(如遇有機溶劑、溫度劇降等)，極易析出結晶，損傷儀器和色譜柱，呈現泵頭處析出“鹽和白粉”的現象。

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