液相色譜儀不同檢測器原理說明

液相色譜儀檢測器的最早思路，一直是努力去除流動相，來適應氣相檢測器。但最終發(fā)現(xiàn)，液體和氣體之間的轉(zhuǎn)化非常麻煩，而且不夠穩(wěn)定。最終調(diào)轉(zhuǎn)了方向，發(fā)展出了和氣相幾乎完全不一樣的液相檢測器技術。

檢測器其實就是一個轉(zhuǎn)換器，它把化合物的物理性質(zhì)或者化學性質(zhì)，轉(zhuǎn)換成一個和這個理化性質(zhì)有關的電信號。每一種檢測器的使用要求，都和背后的原理有關。

1、紫外檢測器

最常見的紫外檢測器，就是根據(jù)化合物對紫外光的吸收能力，把濃度信息轉(zhuǎn)化為吸光度，再通過光電二極管，把光的信號轉(zhuǎn)化為電信號，然后，被計算機收集和記錄。由于紫外吸收能力是一種非常穩(wěn)定的物理性質(zhì)，所以紫外檢測器也是一種非常穩(wěn)定的檢測器。

在有些標準方法中會使用254nm作為檢測波長，那你們有沒有想過，為什么是這個數(shù)字呢？這和歷史的發(fā)展有關。在很長一段時間里，紫外檢測器中使用的是低壓汞燈。而低壓汞燈的最大發(fā)射波長，也就是汞的原子發(fā)射線是253.7nm，四舍五入，就是254nm。也就是說，在這個波長下，燈能量最高，靈敏度最好。然而現(xiàn)在，對于普遍使用氘燈的紫外檢測器，254nm其實并沒有特別的意義。

現(xiàn)在的分析方法，更多是考慮化合物的最大吸收波長和避開流動相的干擾。紫外檢測器對于流動相的要求是不要有紫外吸收的干擾。然而，完全沒有紫外吸收的有機溶劑是沒有的。所以為了把流動相的干擾降到最小，通常測試波長會避開溶劑的截至波長20nm以上。

氣泡的存在也會對吸光度的測定產(chǎn)生干擾，所以預防流通池里產(chǎn)生氣泡就很重要。一般的紫外檢測器會在出口加一條背壓管，產(chǎn)生一點點后壓，阻止氣泡的形成。

2、示差折光檢測器

示差折光檢測器RID，原理就是利用物質(zhì)的折光效應。

折光和密度有關，當化合物進入流通池時，密度可能會比流動相更大，也可能更小。所以示差折光檢測器既會出正峰，也可能出負峰。密度受溫度的影響特別大，所以示差檢測器是所有液相檢測器中，對檢測器保溫要求最高的。另外，不同的流動相比例，密度肯定會不一樣，會引起基線的持續(xù)變化。因此示差折光檢測器不能使用梯度洗脫，只能用等度洗脫。

示差折光檢測器在液相分析中的地位，有點像氣相的熱導檢測器，都是利用折光或者熱導，這種非常普遍的物理性質(zhì)來進行檢測，通用性好但靈敏度不太好。一般是濃度比較高，或者其他選擇性檢測器都沒有響應的時候，才會使用。

3、熒光檢測器

熒光檢測器，顧名思義是用來檢測能產(chǎn)生熒光效應的物質(zhì)。

自然界中能發(fā)射熒光的化合物是很少的，這既是缺點，更是優(yōu)點。因為來自于背景中的干擾會很小，靈敏度非常高。熒光檢測器對流動相有一個特別的要求，就是要嚴格脫氣。這是由于氣泡中的氧氣會引發(fā)熒光猝滅效應，造成峰面積大幅度下降。

4、蒸發(fā)光散射檢測器

蒸發(fā)光散射檢測器ELSD，它利用的物理性質(zhì)是光散射效應。

空氣中的顆粒越多，散射越明顯。蒸發(fā)光散射檢測器通過霧化器等去除溶劑，讓化合物形成懸浮的顆粒，就像陽光中漂浮的塵埃。所以它對溶劑是有要求的，不能使用不揮發(fā)的鹽類，而要用醋酸銨之類的揮發(fā)性緩沖鹽來替代。從原理上就可以看出，蒸發(fā)光散射檢測器更適合分子量大的化合物，這樣才能形成更明顯的散射效應。

（內(nèi)容來源色譜學堂）