使用熒光分光光度計讀數(shù)時要注意什么？

使用熒光分光光度計要讀數(shù)時，建議在熒光發(fā)射峰的最高示值處讀取數(shù)值。當(dāng)尋找最高示值時要仔細(xì)調(diào)整波長旋鈕，觀察波長時目光要垂直于波長指示窗。還要注意當(dāng)熒光值過高時，為了保護(hù)光電倍增管，儀器靈敏度會自動調(diào)低。調(diào)整靈敏度時整機自動靈敏度系統(tǒng)重調(diào)將影響原設(shè)定的熒光零位，調(diào)整靈敏度后請檢查零位，如有變化可重調(diào)零位一次。

        下面以上海棱光F95S熒光分光光度計測試10^-6g/mL 硫酸奎寧為例進(jìn)行說明。

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1、按下儀器總電源開關(guān)。

2、主機預(yù)熱 30 分鐘。

3、按“模式”選擇鍵，進(jìn)入主菜單界面，選擇執(zhí)行熒光值測定功能。

4、準(zhǔn)備樣品

熒光樣品池一盛稀硫酸作參比（或試劑空白），熒光樣品池二裝入樣品溶液

（10-6g/mL 硫酸奎寧），然后用擦鏡紙將四壁擦試干凈。

5、調(diào)整波長

旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)旋鈕，至標(biāo)準(zhǔn)樣品熒光發(fā)射光譜峰值波長處（調(diào)至450nm附近）。

6、靈敏度設(shè)定

打開樣品室蓋，樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“歸一”調(diào)整鍵，調(diào)節(jié)至LCD液晶顯示窗顯示熒光值顯示在10-100左右之間，記下此時的靈敏度檔位。

7、調(diào)零

打開樣品室蓋，樣品池一置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“調(diào)零”調(diào)整鍵，儀器自動調(diào)整0%，至LCD液晶顯示窗顯示0.0±0.1%止。如發(fā)現(xiàn) 0%有漂移，繼續(xù)按下“調(diào)零”調(diào)整鍵，直至LCD 液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。

8、放入待測樣品

置入樣品及樣品定位：打開樣品室蓋，將已裝入樣品（10-6g/mL 硫酸奎寧）的石英熒光樣品池二放入樣品室內(nèi)樣品座上。

9、讀數(shù)

旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)旋鈕，調(diào)至450nm附近時的最高顯示值，至LCD液晶顯示窗顯示的數(shù)值穩(wěn)定下來之后即可讀取熒光值和波長值。波長值由旋鈕左側(cè)的波長指示窗顯示，讀波長時目光垂直觀察，以減少讀數(shù)誤差。

10、關(guān)閉儀器總電源開關(guān)。